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2.1...
PPARγ2启动子的克隆及甲基化与基因表达的相关性分析
作者： 曹雁行 [1] ; 张敏 [2] ; 冯鑫磊 [2] ; 李星星 [2] ; 潘庆杰 [2]
摘要：目的：克隆脂肪组织特异表达且表达受甲基化调控的基因启动子，并构建启动绿色荧光蛋白表达的载体模型。方法：本研究采用甲基化分析技术和荧光定量PCR技术分析PPARγ2基因调控区甲基化水平和基因表达水平的相关性，克隆其启动子，并与CMV缺失的pEGFP—N1连接构建重组质粒载体，之后转染脂肪细胞检测重组载体模型的有效性。结果：PPARγ2基因启动子的甲基化比例与mRNA表达量呈负相关，相关系数r=-0．740230314，获得PPARγ／2基因启动子片段PPARγ2-P，构建的重组质粒pPPARγ2-P—EGFP在脂肪细胞中特异表达。结论：PPAR@基因表达受启动子甲基化调控，试验成功克隆了PPARγ／2基因启动子，且得到启动绿色荧光蛋白表达的载体，为后期建立甲基化依赖的启动子模型提供方法和材料，为转基因动物的制备提供新思路。
关键字： PPARγ2 启动子 甲基化 重组质粒 脂肪细胞
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