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肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体的表达及其活性检测
作者： 赵雪娜 ; 武国栋 ; 孙丽霞 ; 黄山英 ; 王庆民 ; 薛彤彤 ; 王晶翼
摘要：目的：构建肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）高表达工程菌株,以获得具有生物学活性的重组TRAIL蛋白。方法：合成TRAIL基因,转到大肠杆菌中,IPTG诱导获得成功表达;进一步优化,增加可溶形式的蛋白质。利用硫酸铵对发酵液进行沉淀,经Ni柱、阴离子和阳离子交换柱层析,最终获得蛋白质纯品,对其进行体外活性检测。结果：经过IPTG诱导后,TRAIL达到菌体总蛋白的30%;经过优化,可溶形式蛋白达到55%。纯化获得纯度高于95%的TRAIL样品,体外测活结果表明：TRAIL蛋白能有效抑制多种肿瘤细胞增殖,抑制率达到70%～92%。结论：重组TRAIL以可溶形式得到高效表达,且具有较好的生物学活性,为其开发成药用蛋白奠定基础。
关键字： TRAIL 可溶形式表达 活性检测 抑制率
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