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2.1...
Stathmin SiRNA表达载体抑制stathmin的表达
作者： 段佳 [1] ; 黄岚珍 [2] ; 何晓松 [1] ; 易世江 [1] ; 范才文 [2] ; 肖胜军 [2] ; 雷迅 [1]
摘要：目的：构建stathmin特异性SiRNA质粒表达载体,探讨其对鼻咽癌5-8F细胞stathmin的沉默作用。方法：合成用于stathmin基因特异性干扰表达的DNA片段,经退火形成双链DNA片段,片段克隆到质粒表达载体pGenesil 1.1上。载体导入JM109菌株进行筛选与扩增,采用酶切和测序对克隆表达载体进行鉴定。应用脂质体将鉴定后的重组表达质粒载体转入鼻咽癌5-8F细胞,RT-PCR与Western Blot分析stathmin基因表达。结果：经酶切和测序鉴定,插入SiRNA质粒表达载体的stathmin特异性碱基序列和方向正确。重组质粒表达载体转染鼻咽癌细胞后,细胞转染效率达78.8±6.8%,stathmin基因在鼻咽癌中的表达明显下降。结论：构建的stathmin基因SiRNA质粒表达载体能抑制stathmin的表达。
关键字： stathmin RNA干扰 质粒 基因治疗