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2.1...
基于原核表达的副溶血性弧菌类毒素疫苗对海水鱼类免疫保护作用
作者： 王洪斌 [1,2] ; 李士虎 [2] ; 李信书 [2] ; 杨艳艳 [2] ; 阎斌伦 [1]
摘要：目的：实现副溶血性弧菌溶血毒素基因tdh克隆与表达,并以表达产物TDH作免疫原,研究其对海水鱼免疫活性的影响。方法：PCR扩增tdh;构建重组质粒（pET-28-TDH）;IPTG诱导表达;SDS-PAGE检测;以纯化的TDH融合蛋白脱毒为类毒素免疫原免疫健康真鲷,测定其血清中过氧化氢酶（CAT）、酸性磷酸酶（ACP）、超氧化物歧化酶（SOD）和碱性磷酸酶（AKP）活性变化;用副溶血性弧菌病原攻毒,检测免疫保护作用。结果：tdh基因成功克隆并表达;表达蛋白相对分子量为21 kDa,证实为TDH蛋白;类毒素免疫真鲷后,其血清中总超氧化物歧化酶（T-SOD）、酸性磷酸酶（ACP）、碱性磷酸酶（AKP）和过氧化氢酶（CAT）活力在注射后48 h、24 h、24 h、24 h达到最高,最高点分别高于对照组77%、328%、75%、381%;72 h后均恢复至对照组水平。结论：类毒素对真鲷免疫系统具有明显的刺激作用;类毒素免疫后对攻毒的真鲷保护率达50%。
关键字： 副溶血性弧菌 类毒素 免疫活性 免疫保护