拟南芥AtNCED2基因启动子区域序列克隆及其活性分析
作者: 万小荣 [1] ; 莫爱琼 [2] ; 潘家辉 [1] ; 梁翠瑶 [1]
摘要:目的:克隆拟南芥AtNCED2基因启动子区域序列,并分析其组织器官特异性及对外界刺激的响应。方法:通过PCR从拟南芥基因组中克隆AtNCED2基因5’侧翼2295bp启动子区域序列(AtNCED2p),并进行生物信息学分析。构建AtNCED2p驱动GUS的植物双元表达载体pAtNCED2p::GUS,通过根癌农杆菌介导法将其转化野生型拟南芥,检测转基因植株中GUS表达的组织器官特异性。结果:该启动子序列中存在TATA-box、CAAT-box、根器官特异性元件、ABA响应元件、低温响应元件、昼夜节律响应元件等顺式作用元件。GUS活性主要集中在转基因拟南芥根尖及侧根发生部位。外源ABA处理的转基因植株根中GUS活性为174.8nmol4-MU min-1mg-1蛋白,明显高于对照值91.7nmol 4-MU min-1mg-1蛋白。结论:AtNCED2基因可能在根的生长和发育中起作用,且外源ABA处理增强其在根中的表达。
关键字: 拟南芥AtNCED2基因 双元载体构建 启动子克隆及活性分析 脱落酸