棉铃虫核多角体病毒iap3基因表达时相分析
作者: 梁昌镛 ; 李敏 ; 张高瞻
摘要:目的:原核表达棉铃虫核多角体病毒(Helicoverpa armigera nucleopolyhedrovirus,HearNPV)iap3基因,制备该蛋白的多克隆抗体,并利用该抗体分析iap3基因在病毒感染过程的表达时相,为深入研究提供基础。方法:PCR扩增iap3基因后,克隆至pET28b,转化到大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,利用亲合层析进行蛋白纯化,将纯化融合蛋白免疫大鼠制备抗血清,利用抗血清Western blot检测IAP3在病毒感染过程的表达时相。结果:成功在原核细胞中表达iap3基因,并获得纯化的融合His-tag的IAP3蛋白,制备了该蛋白的多克隆抗体。发现iap3基因最早在感染后24h表达,到72h到达表达高峰。结论:获得了IAP3多克隆抗体,iap3基因是一个晚期表达基因。
关键字: 棉铃虫核多角体病毒 iap基因 原核表达 抗体 表达时相
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