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2.1...
小鼠甘丙肽1型受体在HEK293A细胞中的表达和内化
作者： 李晓晓 [1] ; 徐舒 [1] ; 李慧 [1] ; 宫夏霓 [1] ; 徐志卿 [1,2]
摘要：目的：克隆小鼠甘丙肽1型受体（mGalR1）基因,构建其真核表达载体,并观察该基因在HEK293A细胞中的表达和内化。方法：应用RT-PCR方法,以小鼠下丘脑RNA为模板,扩增获得甘丙肽I型受体（mGalR1）基因并定向克隆到pEGFP-N1真核表达载体;mGalR1-pEGFP表达载体瞬时转染HEK293A细胞,利用激光共聚焦显微技术观察mGalR1在给予甘丙肽（10-7mol/L）0、5、10、15min刺激时的内化情况。结果：克隆得到正确的mGalR1基因全长序列,其cDNA为1 047bp,共编码348个氨基酸;共聚焦显微镜结果表明mGalR1主要在膜上表达,经甘丙肽刺激5～15min后受体下膜进入胞浆。结论：成功构建真核表达载体mGalR1-pEGFP并在HEK293A中表达;在甘丙肽刺激下小鼠甘丙肽1型受体存在内化现象。
关键字： 小鼠甘丙肽1型受体(mGalR1) 基因克隆 真核表达载体 HEK293A细胞 内在化