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2.1...
一种带有组氨酸标签的新型表达载体的构建及应用
作者： 齐向辉 [1,2] ; 孙储鹏 [1] ; 何晨曦 [1] ; 沈琦 [1] ; 刘学 [1] ; 郭齐 [1] ; 陈华友 [1] ; 徐虹 [2]
摘要：目的：利用基因重组技术,对已有载体pSE380进行改造,获得具有组氨酸标签的新型表达载体。方法：以pSE380载体为出发材料,通过一步反向PCR技术在多克隆位点处添加一个六聚组氨酸纯化标签,并用该载体对xdh外源基因进行克隆表达及纯化验证。结果：测序结果显示该标签已成功插入,xdh基因克隆表达及纯化表明,镍柱亲和层析完全可以将重组的表达蛋白纯化,并达到电泳纯级别,融合标签并没有影响的该重组酶的功能。结论：通过一步反向PCR技术成功地获得了改造pSE380载体,该技术为载体的相关改造提供了一种方便可行的方法。
关键字： pSE380 表达载体 His标签 一步反向PCR