期刊简介
投稿须知
1.编辑部与作者的约定 1.1文稿必须具有创新性、学术性和科学性。来稿采用网上投稿(发E—mail),一般无需纸质打印稿。请自留底稿,恕不退稿。 1.2请勿一稿多投,文责自负。 1.3本刊是中国学术期刊(光盘版)、中国知网、万方数据资源系统、中文科技期刊数据库的入编期刊和入网期刊,如不同意来稿编入电子出版物,请书面声明,以便本刊处理。 2.来稿要求及注意事项 2.1...
当前位置:首页 > 期刊导读 > 2010 > 03 > 正文

重组人ERP57蛋白克隆和原核表达

作者: 杨建林 ; 韩钰 ; 王艳林 ; 张伟

摘要:目的:克隆人ERP57蛋白进行原核表达和纯化。方法:采用巢式RT-PCR从人非小细胞肺腺癌A549细胞总RNA中克隆人ERP57 cDNA,构建ERP57原核表达质粒(pET-28a/ERP57)并转化E.coli的BL21菌株。IPTG诱导蛋白表达,并在变性条件下经Ni-NTA树脂亲和层析纯化。分别用SDS-PAGE和Western blotting鉴定。结果:成功获得大小为1518bp的人ERP57基因片段,转化菌诱导性表达61kDa的人ERP57蛋白,该蛋白可经Ni-NTA树脂亲和层析高度纯化。结论:成功获得纯化的重组人ERP57蛋白,为后续ERP57蛋白功能研究奠定了基础。


关键字: ERP57    基因克隆    人重组蛋白    原核表达    蛋白纯化      


上一篇:利用SSH技术分离结球甘蓝耐热性相关基因
下一篇:Canstatin-N基因在Pichia pastoris中表达及产物活性分析