“活的非可培养状态”细菌荧光观察方法
作者: 李影 [1] ; 段锐 [2] ; 钱爱东 [1] ; 王伟利 [3]
摘要:目的:建立一套稳定、简便、快捷,可靠的细菌活的非可培养状态(VBNC)荧光显微镜观察方法。利用市售的黑色钢笔墨水着染微孔滤膜,然后采用手动压片方式,将经LIVE/DEAD BacLightTM Bacterial Viability Kit(13152)染色的细菌样本固定在滤膜上,用落射荧光显微镜直接观察。结果:该法所得的荧光图像背景无光亮且黑暗,菌体荧光、形态、排列等均清晰可见,而且呈现绿色荧光的活菌与呈现红色荧光的死菌较易分辨。与现行技术相比,还能缩短染色时间近12~16h。结论:建立的VBNC细菌荧光观察方法能有效地克服现有技术存在的适用范围狭窄、取材困难、观察结果不准确、操作时间长等缺点,可为细菌VBNC研究提供值得借鉴的方法。
关键字: 细菌活的非可培养状态 荧光显微镜 检测方法
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